<h3>又名黃藤根 黃臘藤 紅草 三棱花 紫根 旱禾花 斷腸草 菜蟲草</h3> <h3>雷公藤主要分部在長江流域以南及西南地區(qū)，浙江江西安徽河南廣東臺灣等地</h3> <h3>我院使用含雷公藤制劑近半個世紀救治RA患者無數(shù)，安全有效。減毒增效絕竅如下：中藥復方配伍、地道藥投入嚴密、劑型合理、工藝先進、劑量精確。傳統(tǒng)中藥用現(xiàn)代化實驗證明制劑的安全性、有效性。制劑做了急毒，長毒，藥效實驗，臨床觀察。</h3> <h3>活絡(luò)止痛膠囊小鼠急性毒性試驗資料摘要 活絡(luò)止痛膠囊小鼠經(jīng)口給藥最大給藥量為40g/kg,相當于16gkg生藥量，相當于臨床人用藥量的666.7倍。試驗目的 觀察一次給予小鼠活絡(luò)止痛膠囊后，所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)和死亡情況。受試藥物 活絡(luò)止痛膠囊，由太原市類風濕醫(yī)院制劑室制造，山西正中藥業(yè)有限公司監(jiān)制，批號2001201，0.4g/粒,1g膠囊內(nèi)容物相當于0.4g生藥。配制方法 臨用時取膠囊內(nèi)容物研勻，加水制成50%的混懸液（最大濃度）。動物 昆明種小鼠二級，由中；國藥醫(yī)學科學院實驗動物研究所繁育提供，合格證書：SCXKLL-00-0006，體重18-22g。試驗方法 經(jīng)預試動物未出現(xiàn)死亡，故只進行最大給藥量的測試。取體重20-22g的小鼠20只，雌雄各半，禁食不禁水16小時，以按20g體重灌胃0.8m藥液給藥，一日內(nèi)給予二次，立即觀察 詳細記錄給藥后動物毒性反應(yīng)情況，連續(xù)觀察七天。試驗結(jié)果 活絡(luò)止痛膠囊以最大給藥濃度（50%）最大給藥量（0.8ml/20g*wt）當日二次給予小鼠，連續(xù)觀察七天，未見死亡。在觀察期內(nèi)動物活潑，披毛光亮，攝食，糞便正常?；罱j(luò)止痛膠囊臨床用藥量為一日三次，每次3 粒，0.4g/粒，日用量為3.6g，成人體重以60g計算。小鼠的最大給藥量倍數(shù)=（每只小鼠的給藥量/小鼠平均體重20g）×（成人平均體重60000g/成人每日用量）=666.7倍。相當于臨床人用量的666.7倍。結(jié)論 活絡(luò)止痛膠囊，用臨床給藥途徑，按最大給藥濃度（50%）最大給藥量（0.8ml/20g*wt, 一日二次），給予小鼠，小鼠未見死亡，其最大給藥量相當于臨床人用量的666.7倍。</h3> <h3>清熱消腫止痛藥酒大鼠長期毒性試驗資料及文獻資料摘要 清熱消腫止痛藥酒以4.7g/kg，1.5g/kg,相當于人用量的32倍、10倍連續(xù)給大鼠灌胃3 個月，在給藥前期對大鼠的體重增長有促進作用，后期則無影響，血液學、血液生化學臟器指數(shù)及病理檢查與對照組比較均無顯著性差異，恢復期檢測各項指標均為正常，未見明顯的延遲毒性。高劑量（15g/kg,相當于人用量的100倍）給藥1.5個月，未發(fā)現(xiàn)有明顯的毒性反應(yīng)，3 個月后，大鼠心、肺、睪丸細胞重度萎縮，肝、腎、腎上腺、甲狀腺細胞輕度萎縮，其他儲器及血液學、血液生化學指標均為正常?；謴推跈z查，大鼠受損害的臟器得到了恢復，睪丸也有所長大，未發(fā)現(xiàn)明顯的延遲毒性反應(yīng)，表明高劑量產(chǎn)生的毒性是可逆的。試驗目的 觀察連續(xù)重復給予清熱消腫止痛藥酒對大鼠所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，首先出現(xiàn)的癥狀和嚴重程度，毒副反應(yīng)的靶器官及其恢復和發(fā)展情況。確定無毒反應(yīng)劑量，為擬定人用安全劑量提供理論上的依據(jù)。受試藥物 清熱消腫止痛藥酒，1ml藥液相當于0.2g 生藥，含醇量28%（酒精計測量）。浸藥用空白酒含乙醇量30%。試驗前取藥液600C減壓濃縮，用蒸餾水和白酒制成含酒5%的所需濃度的藥液。動物 SD大鼠，SPF級，140只，體重90-110g雌雄各半，由北京利華實驗動物技術(shù)有限公司提供。合格證書：SCXKLL-00-0008。試驗方法 將大鼠隨機分組，每組30只，分籠飼養(yǎng)，在本實驗室飼育一周，觀察各組動物活動、進食、糞便等情況均無異常后，采用臨床途徑灌胃給藥。各劑量組按等量不同濃度對照組給予蒸餾水，連續(xù)三個月。每周稱體重一次，根據(jù)體重變化，調(diào)整灌胃體積。實驗期間觀察動物的行為活動、外觀體征、體重、皮毛攝食及糞便等情況。1、試驗周期 因本品臨床治療一個月為一個療程，所以試驗期設(shè)為三個月。2、劑量和分組 急性毒性實驗表明小鼠經(jīng)口給藥LD5091.01g/kg，相當于臨床人用量的606.7 倍，且含有毒藥材雷公藤，為酒劑，所以設(shè)溶媒對照組、正常對照組、高劑量組、中劑量組、低劑量組，五組。溶液媒組、正常對照組、高劑量組和中劑量組，各30只大鼠，低劑量組20只大鼠，雌雄各半。給藥容量勻為100g體重2ml藥液。溶媒對照組： 給予等容量的5%空白酒。正常對照組：給予等容量的蒸餾水。高劑量組：以臨床人用量的100倍15g/kg生藥量給予灌胃。低劑量組：以臨床 人用量的10倍，即1.5g/kg生藥量給予灌胃。中劑量組：取高、低劑量比例中項，即（高×低）1/2=4.734g/kg生藥量，相當于臨床人用量的32倍。觀察指標 在給藥一個半月和三個月時，每給取10只大鼠，雌雄 各半，禁食不禁水16小時，采血檢查血液學指標和血液系列化指標，剖析取心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、甲狀腺、胸腺、腦、睪丸、前列腺、子宮、卵巢，肉眼觀察形態(tài)變化，稱重，求出臟器系數(shù)（臟器重g/100g體重），連同胃、十指腸一起用福爾馬林溶液固定，常規(guī)病理切片，進行組織學檢查。停藥后的動物繼續(xù)觀察4周，再檢測上述項目。試驗結(jié)果 1、一般觀察 試驗期間，動物活潑健康，皮毛光亮，行為活動、外觀體征、糞便性狀等未見異常，各組大鼠體重均呈現(xiàn)增長趨勢，高劑 量組動物體重、進食量與對照組比較未見顯著差異，中、低劑量組動物的體重增長率在給藥十一周前較對照組快，而以后與對照組比較沒有差異，可能是較低劑量下有一定的強壯作用。試驗過程中動物除灌胃操作失誤至死外，無一因藥物的毒性而死亡。2血液學檢查：實驗表明清熱消腫止痛藥酒高、中、低劑量組動物組血液學指、標與對照組比較均無明顯差異（P>0.05）。結(jié)果見表2 。3、血液生化指標檢查 試驗證實給藥各組動物的血液生化指標與對照組比較無顯著得性差異，結(jié)果見表3。4、臟器檢查： 解剖動物各臟器肉眼觀察，色澤正常，質(zhì)地彈性好無出血現(xiàn)象，稱取心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、灌甲狀腺、胸腺、睪丸、前列腺、子宮、卵巢濕重，計算臟器系數(shù)數(shù)（g/100g體重）。高劑量組除肝和睪丸較對照組小，且有明顯差異外，其余臟器與對照組比較沒有顯著性差異。結(jié)果見表4。5、病理檢查：病理檢查心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、甲狀腺、胸腺、睪丸、前列腺、子宮、卵巢、胃、十二指腸。給藥1.5月時，給藥各組之臟器未見病理性損害。給藥3個月時，高劑量組動物心、睪丸、肺細胞重度萎縮，肝、腎、腎上腺、甲狀腺細胞輕度萎縮，其余臟器未見病理性改變，中、低劑 量組之臟器均為正常。在停藥四周后（恢復期），再對高劑量組和對照組動物進行病理檢查，高劑 量組各臟器均未見病理性改變。詳見病理檢查報告及病理圖片。討論 綜合上述各方面檢查，連續(xù)用藥1.5個月時，給藥各組動物未見毒性反應(yīng)。連續(xù)給予3個月，給藥各組動物的血液學指標、血液生化指標與對照組比較均無顯著性差異，臟器指數(shù)除高劑量組肝和睪 丸較對照組小外，其他各臟器未見異常，中、低劑量對大鼠體重生長有一定的促進作用，低劑量組尤為明顯。在高劑量組動物的多個臟器發(fā)生病理 性改變時，動物的血液學指標、血液生化指標未變化，可能是由于動物心、睪丸、肺細胞雖明顯損傷，但肝、腎、腎上腺、甲狀腺損傷，再加體內(nèi)的代償機制起作用，使其功能還能保持正常。停藥后經(jīng)恢復期觀察，給藥各組動物的各項指標均正常未發(fā)現(xiàn)有明顯的延遲毒性反應(yīng)。高劑量組動物受損害的臟器得到了恢復，睪丸也有一定的長大，各項檢測均為正常，表明高劑 量對臟器的損害基本可以恢復，這與資料3、4報道基本一致。結(jié)論 試驗表明清熱消腫止痛藥酒以4.7g/kg、1.5g/kg,相當人用量的32倍、10倍連續(xù)給大鼠灌胃3個月，在給藥前期對大鼠的體重增長有促進作用，后期則無影響，血液、血液生化學、臟器指數(shù)及病理學檢查與對照組比較均無顯著性差異，停藥4周后，各項檢測指標均正常，亦未發(fā)現(xiàn)明顯的延遲毒性反應(yīng)。高劑量組（15g/kg,相當于人用量的100倍）給藥1.5個月后，各項指標均正常，未發(fā)現(xiàn)有明顯 的毒性反應(yīng)。3 個月后，大鼠心、睪丸、肝出現(xiàn)明顯病理損傷，肝腎、腎上腺、甲狀腺發(fā)生輕度病理性損害，其余臟器未見顯著異常改變，臟器指數(shù)除肝、睪丸的臟器指數(shù)較對照組小且有顯著差異外，其他臟器與對照組比較沒有顯著差異，大鼠體重、血液學、血液學指標與對照組比較沒有顯著差異，大鼠體重、血液學、血液生化學指標與對照組比較沒有顯著差異。停藥4周后，大鼠受損害的臟器得到了恢復，睪丸也有所長大，血液學、血液生化學指標均正常，未發(fā)現(xiàn)明顯的延遲毒性反應(yīng)，表明高劑量產(chǎn)生的毒性是可逆的。</h3> <h3>雷公藤Lei gong teng 本品為衛(wèi)矛科植物雷公藤Tripterygium wilfordii Hook. F.的干燥根及根莖。夏、秋二季采挖，除去雜質(zhì)，趁鮮切片，干燥?！拘誀睢?本品根呈圓柱形，有分枝，略彎曲，根莖粗壯，外皮粗糙，多呈灰褐色，直徑約0.5-9cm，粗細不等。栓皮橙黃色或灰黃色，有不規(guī)則的細縱紋和橫裂紋，易剝落。質(zhì)堅韌、不易折斷。多砍為0.3-0.9cm厚的斜砍片，斷面皮部棕紫色或棕褐色，顆粒狀，木部黃白或淡棕褐色。氣微香，味澀、苦。【鑒別】 （1）本品橫切面：木栓層由數(shù)十列類長方形細胞組成，多數(shù)可見落皮層。有的細胞中含鮮黃色物質(zhì)。皮層窄，細胞呈長橢圓形，切向排列。韌皮部篩管群呈徑向排列，形成層連成環(huán)。木質(zhì)部導管較稀疏，單個或1-2個相聚，散在，壁木化，直徑28-100μm，木纖維發(fā)達，壁厚，木化；射線寬1-6列細胞，多數(shù)細胞具單紋孔，薄壁細胞含淀粉粒、草酸鈣方晶和棕黃色物質(zhì)。粉末土黃色或淡黃色。木纖維散在或成束,長棱形,長300～780μm,直徑11～28μm。木栓細胞多角形。淀粉粒眾多,類圓形,單個 或2～3個或多個聚集,直徑2.8～8.4μm,最大可達16.8μm,有時可見復粒.層紋有時可見,臍點呈點狀、星狀或人字形。分泌細胞類圓或橢圓形,直徑21.8～41.7μm,胞腔內(nèi)充滿棕色物質(zhì)。（2）取本品粉末5g,加乙醇50ml置水浴上加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干、殘渣加0.1mol/L鹽酸5ml使溶解、濾過，濾液分置二支試管中，一管中加入碘化鉍鉀試液2滴，產(chǎn)生黃色沉淀，另一管中加入碘化汞鉀試液2滴，產(chǎn)生黃白色沉淀。（3）取本品粉末20g，加無水乙醇 100ml，回流提取1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加醋酸乙酯3ml使溶解，加中性氧化鋁3g，攪勻，揮去溶劑。置中性氧化鋁柱（內(nèi)徑1.5cm, 100～200目，11g，干法裝柱）上，用氯仿100ml洗脫，洗脫液回收氯仿至干，殘渣加無水乙醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取雷公藤甲素對照品，加無水乙醇制成每1ml 含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2005年版一部附錄ⅥB）試驗，吸取供試品溶液10μl，對照品溶液5μl,分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-乙醚（2：1）為展開劑，展開，取出，晾干，先噴以2% 的3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液，再噴以8% 氫氧化鉀乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點?！竞繙y定】 照高效液相色譜法（《中國藥典》2005年版一部附錄VI D）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填表充劑；流動相：甲醇-水（45：55）；流速：1ml/min；檢測波長：218nm；柱溫：35o C。對照品溶液的制備 精密稱取雷公藤甲素適量，置棕色容量瓶中，加流動相制成每1ml含0.010mg的溶液，即得。供試品溶液的制備 精密稱取雷公藤粉末（過50目篩）3g，置三角瓶中，精密加乙酸乙酯50ml，精密稱定，水浴回流3 小時（水溫80oC），放冷，再精密稱定，用乙酸乙酯補足減失重量，濾過，取續(xù)濾液25ml，過中性氧化鋁柱（內(nèi)徑1.5cm，100～200目，3g，干法裝柱），用乙酸乙酯50ml洗脫，收集洗脫液，水浴蒸干，殘渣加流動相適量超聲處理10min(30oC)使溶解，并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μL注入液相色譜儀 ，測定，即得。本品按干燥品計算，含雷公藤甲素（C20H24O3）不得少于0.0007%【炮制】 除去雜質(zhì)，洗凈，干燥?！拘晕杜c歸經(jīng)】 苦寒，歸肝、脾經(jīng)?！竟δ芘c主治】 清熱解毒，祛風除濕，舒經(jīng)活血通絡(luò)，消腫止痛，殺蟲止癢。主治風濕痹痛，疔瘡癤腫，皮膚瘙癢，類風濕性關(guān)節(jié)炎，風濕熱，風濕性關(guān)節(jié)炎，強直性脊柱炎，紅斑狼瘡?！居梅ㄅc用量】 6-10g ?！咀⒁狻?本品有毒，內(nèi)服宜慎?！举A藏】 置通風干燥處，防霉，防蛀。</h3> <h3>名稱】 根據(jù)文獻資料[1]-[8]命名。【性狀】 根據(jù)湖南省雷公藤質(zhì)量標準等[1] 文獻資料[8] 和使用的雷公藤藥材飲片性狀描述。本品與同科同屬的昆明山海棠易混淆，其區(qū)別見附表資料、圖。 【鑒別】 （1）橫切面與粉末：參照“湖南省雷公藤質(zhì)量標準等[1]” 及“雷公藤的研究與臨床應(yīng)用”制定。實際樣品與此相符,故按此描述。（見附資料圖）（2）為雷公藤生物鹼和內(nèi)酯成分的鑒別，方法簡便重現(xiàn)性好。自1936年首次報道從雷公藤根部提取分離得萜類色素雷公藤紅以來,已從雷公藤屬植物中分離出100多種成分[1][2][9],主要是生物堿類、二萜類、三萜類、倍半萜類及多糖,其中二萜類和生物堿類是主要的活性成分。生物堿類自80年代以來,已從雷公藤中分得20多種生物堿:雷公藤晉堿(Wilforgine);雷公藤明堿(Wilfordsine);雷公藤定堿(Wilfordine);雷公藤靈堿(Wilforine);雷公藤春堿(Wil-foriine);雷公藤增堿(Wilforzine);雷公藤堿戊(Wilforidine);雷公藤堿已(Wilfomine);新雷公藤靈堿(Neowilforine);雷公藤寧堿(Wilfornine);雷公藤次堿(Wilfortrine);苯乙烯南蛇堿(Celacinnine);呋喃南蛇堿(Celafurine);苯代南蛇堿(Celabenize);南蛇藤別肉桂酰胺堿(Celallocinnine)二萜類雷公藤屬植物所含二萜化合物,屬香烷型,是生理活性的主要成分,至今已從雷公藤植物中分得14種二萜化合物:雷公藤甲素(Triptolide)、乙素(Tipdiolide)、丙素(Tripteroilide);異雷公藤內(nèi)酯四醇(Isotriptetraolide)、雷公藤酮(Triptonide);雷醇內(nèi)酯(Triptolidenol);山海棠素(Hyponide);雷酚酮內(nèi)酯(Triptonolide);雷酚新內(nèi)酯(Neotrip-tophenolide);異雷酚新內(nèi)酯(Isontriptophenolide);山海棠甲醚(Hypolidemethylether);雷酚萜(Triptonoterpene);雷酚萜甲醚(Triptonoterpenemethylether);雷酚萜醇(Triptonoterpenol)。2.3 三萜類雷公藤三萜均為五環(huán)三萜,至今已分得25種三萜化合物:雷公藤內(nèi)酯甲、乙(Wilfor-lideA,B);雷公藤三萜內(nèi)酯甲(TriptotriterpenoidallactoneA);雷公藤三萜酸甲、乙、丙(TriptotriterpenicacidA,B,C);3,24-二氧代木栓烷-2-9-羧酸(3,24-Dioxo-fridelen-2-9-oic);3-Epikatonicacid;Selaspermicacid;雷公藤紅(Tripterine);Demethylzeylasteral;齊墩果烷-9(11),12-二烯-3-酮(oleanna-9(11),12-dien-3-one);雷二羧酸甲酯(Triptodihy-droxyacidmethylether);黑曼酮酯甲(Regelin );黑曼酮酯乙(Regelin );黑曼酮酯丙(Regelin );黑曼酮酯丁(RegelinD);黑曼醇酯甲(RegelidiolA);黑曼醇酯乙(Rege-lidiolB);Ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one;Stigmasta-4-en-3-one;對羥基苯甲酸;3, 4-二羥基苯甲酸;3-甲氧基-4-羥基苯甲酸。倍半萜類自從1986年陳昆昌等分得一具有α,β-不飽和內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的倍半萜單體——雷公藤素(Wilfonide)以后,日本學者相繼從雷公藤根中分出11個倍半萜類化合物:TriptofordinsA,B,C-1,C-2,D-1,D-2,E,F-1,F-2,F-3和F-4。而后又從雷公藤果實中分離出23個新的倍半萜酯類化合物——雷公藤酯(Triptogelin)A-1,A-2,A-3,A-5,A-6,A-7,A-8,A-9,A-10,A-11,B-1,A-4,B-2,C-1,C-2,C-3,C-4,E-1,E-2,E-3,E-4,G-1和D-1。2.5 蒽醌化合物夏志林等已從雷公藤莖葉中分離出一種蒽醌化合物1,8-二羥基-4-羥甲基蒽醌(1,8-Diphydroxy-4-hydrxymethylanthraquinone)。其他成分 從雷公藤中還分離出甙、有機酸、衛(wèi)矛醇、衛(wèi)矛堿、β-谷甾醇、1-表兒茶酸等成分。（3）為雷公藤的薄層檢識[4]。以雷公藤甲素為對照品，薄層色譜試驗，重現(xiàn)性好、故收入正文。（見附圖）?！竞繙y定】 （一）儀器與試藥（二）對照溶液的制備 （三）供試品溶液的制備 精密稱取雷公藤粉末（過50目篩）3g，置三角瓶中，精密加乙酸乙酯50ml，精密穩(wěn)定，水浴回流，3 小時（水溫80oC），放冷，再精密稱定，用乙酸乙酯補足減失重量，濾過，取續(xù)濾液，25ml，過3g中性氧化鋁柱（內(nèi)徑1.5cm,100～200目），用乙酸乙酯50ml洗脫，收集流出液和洗脫液，水浴蒸干，殘渣加流動相適量超聲處理10min(30oC)使溶解，并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。（四）線性關(guān)系試驗 精密稱取雷公藤甲素0.27mg,置2ml容量瓶中，加流動相至刻度，各精密吸取適量，并加流動相定容得工作曲線溶液。按樣品測定相下色譜條件進樣測定分別重測定峰面積如下：以雷公藤甲素濃度（C）為橫坐標，以峰面積平均值（A）為縱坐標，繪制標準曲線，進行回歸，得線性回歸方程：A=18670C-203.5, r=0.9998, 表明雷公藤甲素在0.027～0.54μg與峰面積有良好的線性關(guān)系。（五）精密度試驗 以濃度為30μg/ml的雷公藤甲素對照品溶液連續(xù)進樣6次，每次20μl，測定結(jié)果如下：(六) 穩(wěn)定性試驗以濃度為44μg/ml的雷公藤甲素對照品溶液在下表不同時間進樣，每次20μl，測定結(jié)果如下：表明雷公藤甲素對照品溶液在96h內(nèi)穩(wěn)定。取同一份供試品溶液在下表時間分別進樣，每次20μl，測定結(jié)果如下：表明供試品溶液在48h 內(nèi)穩(wěn)定。（七）重現(xiàn)性試驗 取同一批次樣品6份，依據(jù)上述雷公 藤甲素含量測定方法制備供試品溶液并進行測定，計算雷公藤甲素含量及其RSD值，結(jié)果見下表：（八）回收率試驗 精密稱取樣品6份，每份1.5g，置三角瓶中，再分別精密加入雷公藤甲素17μg，按樣品制備方法進行制備并進行測定，計算回收率，結(jié)果如下：（九）飲片中雷公藤甲素含量測定取兩批樣品各6份，依據(jù)上述雷公藤甲素含量測定方法以制備供試品溶液并進行測定，計算雷公藤甲素的含量，并計算其RSD值。祥見下表：一批 二批選用購至湖南的具有代表性的兩批藥材樣品，經(jīng)雷公藤甲素含量測定，其含量為7.953～12.23μg/g之間，為此定為本品按干燥品計算，含雷公藤甲素（C20H24O3）不得少于0.0007%【炮制】 根據(jù)炮制的實際方法和文獻資料 [8]擬定。 【性味與歸經(jīng)】根據(jù)文獻資料[2]-[5] ?！竟δ芘c主治】根據(jù)文獻資料[2][3][5][8]和臨床使用[13][14]主治范圍整理?！居梅ㄅc用量】 雷公藤的主要用藥部位是根,研究表明[2] [3] [5][10],同一季節(jié)雷公藤根皮中雷公藤甲素含量高于根心,秋季植物中甲素含量大于春季。有人對雷公藤生藥學進行了探討，研究了雷公藤的裁培管理技術(shù)，測定了不同地區(qū)、不同用藥部位的雷公藤和昆明山海棠的總生物堿含量,結(jié)果表明浙江永康雷公藤根皮中總生物堿含量最高，人工栽培與野生雷公藤中所含有效成分生物堿和二萜內(nèi)酯在種類上基本一致,但在含量上有所差異,人工栽培的偏低。雷公藤在泰寧縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)均有分布,一般生長在海拔300～500m的丘陵地。各產(chǎn)地雷公藤甲素含量差異較大,同一產(chǎn)地以根皮含量最高,莖次之,去根皮的木最低。由于雷公藤根皮毒性很大，木部的毒性較小、因此其用量差別也很大?！肚Ы鹨健酚涊d，一般成人每日用劑量6-12g，極量30g?！吨兴幋筠o典》記載，雷公藤治療類風濕關(guān)節(jié)炎日用量在15g上下。含根皮的全根用量為6-12g、最大不超過15g，木部用量為5-25g ,最大不超過30g。我們對含有雷公藤藥材的制劑做了毒性試驗研究：清熱消腫止痛藥酒LD50為96.0g/kg生藥量，相當臨床用藥量的606.73倍。消腫止痛合劑小鼠LD50為85.435g/kg生藥量，相當臨床用藥量的833.6倍。在臨床實際使用劑量為：清熱消腫止痛藥酒用量為，每日三次，每次10-15ml。每日雷公藤用量4.08-6.12g。消腫止痛合劑，每日口服3次，每次20ml，每日雷公藤用量6.282g。清熱通痹合劑為每日口服3次，每次10ml，每日雷公藤用量4.08g。 活絡(luò)止痛膠囊每日口服3次，每次2-3粒，每日雷公藤用量0.36-0.54g在20多年的實際使用中對癥狀有較好作用，但從未發(fā)生中毒事件。根據(jù)文獻資料及實際臨床使用劑量及毒性試驗結(jié)果，本著慎重安全的原則，將本標準臨床用量定為6-10g，較《中藥大辭典》含根皮的全根用量為6-12g、最大不超過15g減少到6-10g ,這個劑量符合我們的實際用量，又比經(jīng)典使用劑量用量減少，使雷公藤用量在安全用量范圍之內(nèi)，保證用藥絕對安全。為了安全又在不同的制劑使用說明中，規(guī)定了不同的注意事項，如酒劑規(guī)定了酒精過敏者、腎功能不全者慎用。其它劑型規(guī)定了：孕婦哺乳期婦女慎用等。 【注意】 [8]雷公藤療效確切，一般煎湯內(nèi)服每次10～15g,使用時,應(yīng)注意劑型、劑量及療程長短。不僅具備激素與免疫抑制樣的作用,而且.無激素樣副反應(yīng), 雖然此藥有一定毒性,但是仍不失為一種有前途的藥物。本雷公藤藥材質(zhì)量標準僅作為醫(yī)院制劑的原料藥材質(zhì)量標準。參考文獻[1] 《湖南省中藥材標準》1993年版 雷公藤 《上海市中藥材標準》1994年版 雷公藤 《山西省抗類風濕膠囊原料藥材標準起草說明書》95-01 雷公藤[2] 李瑞琳等 雷公藤的研究與臨床應(yīng)用、中國科技出版社、1989年15、17、42、48、60頁。[3] 趙仲坤等 藥學情報通訊、1991、1（9）：58。[4] 劉訓紅等 中藥材薄層色譜鑒別，天津科技出版社、1990年，111頁。[5] 江蘇新醫(yī)學院、中藥大辭典、上海科技出版社、下冊、1986年2469頁。[6] 夏志林 中國中藥雜志 1990、2（5）：60[7] 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要:目的:評價消痹藥酒治療類風濕性關(guān)節(jié)炎(ＲＡ)的有效性安全性。方法:運用弗氏完全佐劑所致大鼠關(guān)節(jié)炎作為類風濕性關(guān)節(jié)炎的模型,觀察消痹藥酒對模型鼠關(guān)節(jié)腫脹度和關(guān)節(jié)組織病理變化的影響。結(jié)果:消痹藥酒能減輕模型鼠`；關(guān)節(jié)腫脹度,對免疫注射后繼發(fā)病變具有良好的治療作用,說明該藥具有抗炎免疫作用,病理學觀察證實該藥能減輕關(guān)節(jié)滑膜的充血水腫和炎細胞浸潤、抑制滑膜細胞增生,減輕關(guān)節(jié)軟骨和軟骨下骨組織的破壞程度,抑制模型鼠患肢的致殘。關(guān)鍵詞:類風濕性關(guān)節(jié)炎;消痹藥酒;扶他林類風濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoidarthritis,ＲＡ)為全身進行性關(guān)節(jié)損害的慢性全身結(jié)締組織病,特點是多數(shù)關(guān)節(jié)呈對稱性關(guān)節(jié)滑膜炎癥,常從小關(guān)節(jié)起病,其次為漿膜、心、肺、眼等結(jié)締組織發(fā)生炎癥,因以關(guān)節(jié)炎癥為主癥,故稱為類風濕性關(guān)節(jié)炎。ＲＡ是一種常見的多發(fā)疾病。據(jù)國外資料統(tǒng)計,發(fā)病率占人群1%左右,國內(nèi)無精確的統(tǒng)計,據(jù)1984年東北、北京和汕頭等地調(diào)查,其發(fā)病率在0.24%～0.5%左右,較國外為低。ＲＡ以青壯年較多,好發(fā)年齡為20～45歲,女性發(fā)病率明顯高于男性,男女之比為1:3。ＲＡ致殘率很高,嚴重影響患者的生命質(zhì)量,目前尚無根治方法,有關(guān)ＲＡ的研究較多,但由于本病的治療藥物多存在較大的毒副作用,患者往往因此被迫中期停藥,故很難達到一個理想的治療,因此開展了本藥治療ＲＡ研究工作。消痹藥酒是依據(jù)中醫(yī)藥理論組方制成的一種安全高效治療類風濕性關(guān)節(jié)炎內(nèi)服中藥。實驗材料 實驗動物3～4月齡雄性Wistar大鼠50只,體重(180±10)ｇ,昆明種小白鼠20只,♀♂兼顧,體重(20.38±1.74)ｇ,均由山西醫(yī)科大學實驗動物中心提供。大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周,標準鼠飼料喂養(yǎng),自由飲水取食。實驗用藥 試劑:弗氏完全佐劑(Ｆreud’Scmｓ ｐleteadjuvant,FCA):由山西省醫(yī)藥公司購進。消痹藥酒:太原市類風濕病醫(yī)院制備,規(guī)格為250ｍｌ/瓶。扶他林:規(guī)格為25ｍｇ/片,北京諾華制藥有限公司,與0.9%生理鹽水制成混懸液。冰醋酸:山西省醫(yī)藥公司化學試劑部購進,配成1%醋酸生理鹽水(冰醋酸:生理鹽水為1:100)。實驗儀器ＯLYPUS顯微照相機:日本產(chǎn);ＯLYMPUS光學顯微鏡:日本產(chǎn);滑動切片機:ＬEICASM2000Ｒ;0.5%生理鹽水一次性注射器:山西省醫(yī)療器械公司購進;游標卡尺(精確度0.01ｍｍ)、手術(shù)器械:由實驗單位自備。實驗方法 鎮(zhèn)痛實驗取昆明種小白鼠20只隨機分兩組,雌雄兼顧,ｉｇ給藥,于給藥后1ｈ,ｉｐ1%醋酸生理鹽水(冰醋酸:生理鹽水1:100)0.01ｍｌ/ｇ體重,觀察3ｍｉｎ內(nèi)各組小鼠的扭體次數(shù),實驗分為消痹藥酒組和生理鹽水對照組進行,結(jié)果見表1?？寡酌庖邔嶒瀸嶒炐裕遥聊Ｐ偷慕ā辶ⅰ∪「ナ贤耆魟?支(10ｍｌ),購于由山西省醫(yī)藥公司,無菌條件下,造模大鼠每只右后足跖皮內(nèi)注入0.1ｍｌ佐劑致炎,復制ＲＡ大鼠模型。正常組(5只)僅注射生理鹽水,0.1ｍｌ/只。實驗分組及用藥 實驗用Ｗｉｓｔａｒ健康雄性大鼠,造模后隨機將實驗動物分為3組。隨機抽取15只作為模型空白組:給予0.9%生理鹽水,2ｍｌ/天灌胃給藥,每日1次,持續(xù)30天。隨機抽取15只作為消痹藥酒組:給予消痹藥酒(0.2016g/ｍｌ),劑量為ｍｇ/ｋｇ灌胃給藥,每日1次,持續(xù)30天。隨機抽取15只作為扶他林組:給予扶他林水溶液,劑量為0.2ｇ/ｋｇ/ｄ,灌胃給藥,每日1次,持續(xù)30天。正常組未進行任何治療。實驗觀察對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響。觀察模型空白組、治療組、對照組右后足跖與踝部的急性炎性腫脹,10～14ｄ后繼發(fā)的全身多發(fā)性關(guān)節(jié)炎,足墊厚度及踝關(guān)節(jié)周長測量。病理檢測 處死方式與處死時間 全部動物用脊椎脫臼法處死,模型空白組分別于免疫注射后第7天、第15天、第30天、第40天處死,每次2只;對照組和治療組均于致炎造模3ｄ后灌胃給藥,與模型空白組同期取材,每次2只。正常組于試驗結(jié)束后全部處死。標本處理 無菌條件下取出大鼠右踝關(guān)節(jié)與滑膜組織做標本,用鋒利刀片切成適當大小組織塊(1ｃｍ×1ｃｍ×0.3ｃｍ),放于10%福爾馬林溶液中固定24ｈ,24ｈ后置于40%甲醇溶液中脫鈣4天,梯度酒精脫水,流水沖洗,石蠟包埋,超薄切片。ＨＥ染色 石蠟切片裱于干凈載玻片上,60°烤片機烤片過夜,二甲苯脫蠟5ｍｉｎ×4,100%、95%、85%酒精各沖洗5ｍｉｎ,蘇木素-伊紅染色,ＨＥ染色。光鏡下觀察關(guān)節(jié)滑膜,軟骨與骨髓腔的病理改變,并與正常大鼠關(guān)節(jié)組織作比較。統(tǒng)計分析采用ｔ檢驗和Ｒｉｄｄｉｔ檢驗,ＳＰＳＳ軟件包處理。實驗結(jié)果對小鼠醋酸致扭體反應(yīng) 見表1。消痹藥酒對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠右后肢足跖腫脹及踝關(guān)節(jié)周長的影響 分別見表2、3。消痹藥酒對ＲＡ大鼠關(guān)節(jié)病理組織的觀察比較 見表4。表1對小鼠醋酸致扭反應(yīng)的影響（X土S）注：與生量鹽水組相對照P<0.01 表2 消痹藥酒對佐劑性關(guān)節(jié)炎右后肢足跖腫脹影響 ( ｘ±ｓ)注:ｎ=7 Ｐ*表示消痹藥酒組、扶他林組與模型組比較 Ｐ**表示消痹藥酒組與扶他林組比較表3 消痹藥酒對佐劑性關(guān)節(jié)炎右后肢踝關(guān)節(jié)周長的影響(ｘ±ｓ)注: Ｐ:表示消痹藥酒組、扶他林組與模型組比較, Ｐ:表示止痹痛藥酒組與扶他林組比較 統(tǒng)計結(jié)果表明,消痹藥酒能明顯減少Ｈ+所致的小鼠疼痛相對次數(shù)(Ｐ<0.05),表明消痹藥酒有良好的鎮(zhèn)痛作用。表4 消痹藥酒對ＲＡ大鼠關(guān)節(jié)病理組織的觀察比較注:觀察指標:+輕度,++中度,+++重度,±輕微,-無病變從表2、3中可以看出,消痹藥酒組具有明顯的抗炎消腫作用。討 論雖然現(xiàn)代醫(yī)學對ＲＡ的病因和發(fā)病機制進行了深入的研究,但由于其病情的復雜性,病程的遷延性,愈后的不良性和西藥的毒副作用,以及多器官多系統(tǒng)受累的特點,即使診斷明確,其治療也相當棘手。而消痹藥酒是依據(jù)中醫(yī)藥理論結(jié)合現(xiàn)代中藥藥理的研究成果,為了探索一種安全高效治療類風濕關(guān)節(jié)炎新的中藥劑型。實驗研究證明,關(guān)節(jié)滑膜炎是ＲＡ病變的基本病理特征,幾乎貫穿病變?nèi)?。持續(xù)進行性滑膜炎最終導致關(guān)節(jié)軟骨和骨的破壞,引起關(guān)節(jié)畸形而致殘。因此在不能根本性徹底治愈的情況下,抑制滑膜炎,阻止對骨的侵襲是治療ＲＡ的主要目的。消痹藥酒具有減輕滑膜充血、水腫、肉芽腫形成,抑制血管翳的形成。從病理切片觀察到,第7天、第15天,空白組與對照組相比,局部滑膜充血、水腫、炎性肉芽腫,小血管擴張充血較重;在第30天,消痹藥酒組模鼠滑膜充血、水腫程度明顯減輕,肉芽腫少量存在,纖維組織散在。說明該藥具有抗炎、抑制肉芽組織增生作用。從發(fā)展趨勢看,消痹藥酒組較扶他林組表現(xiàn)更明顯,其能抑制血管增生、抑制滑膜的增生和血管翳形成,阻止ＲＡ滑膜炎癥的進展和骨質(zhì)侵襲。且中藥作用持久,使模型鼠活動征象恢復較快。從動物實驗觀察中可以看出,消痹藥酒組模鼠患肢的恢復要比空白組提前14～21天。至后期消痹藥酒組作用逐漸增強,說明消痹藥酒長期作用效果/′一人一人明顯。實驗結(jié)果表明消痹藥酒方能夠阻止炎性介導過程,減輕滑膜增生,抑制血管翳形成, 抑制纖凝,增強纖溶,使癥狀得到改善,為臨床應(yīng)用消痹藥酒治療類風濕性關(guān)節(jié)炎,特別是治療急性期發(fā)作、類風濕性關(guān)節(jié)炎第一期,第二期以及中醫(yī)辨證中的風濕熱郁型痹癥提供了理論依</h3>